Construcción y evaluación de una escala sobre conocimientos en primeros auxilios en estudiantes de educación media Medellín-Bello / Construction and evaluation of a scale about knowledges of first aid in students of high school, Medellín-Bello

Introducción: los primeros auxilios son una vía expedita para atender accidentes en el hogar, el trabajo, el estudio y lugares públicos. En Medellín y Bello se desconoce el perfil de conocimientos sobre el tema en estudiantes de secundaria y no se dispone de una escala válida y fiable para medirlos. Objetivo: construir y evaluar una escala sobre conocimientos en primeros auxilios y analizar su puntaje en estudiantes de décimo y undécimo. Materiales y métodos: estudio transversal en 445 estudiantes seleccionados mediante muestreo probabilístico. En la evaluación de la escala se determinó la validez de apariencia y contenido, la validez de constructo y predictiva con análisis factorial, fiabilidad con α de Cronbach y consistencia interna por correlaciones de Pearson. En el perfil de conocimientos, los análisis de realizaron con frecuencias y medidas de resumen, U de Mann-Whitney, correlación de Sperman, Anova y regresión lineal multivariable. Resultados: la fiabilidad fue 0,7 y se hallaron correlaciones significativas entre cada punto de la escala y el puntaje global de conocimientos, el cual fue 42 (en una escala de 0-100) y no se encontró asociación estadística con la edad, el sexo, el grado escolar ni el municipio de residencia; sólo hubo asociación con el estrato socioeconómico. Conclusión: la combinación de algunos parámetros fisicoquímicos y microscópicos reportados en el uroanálisis puede ser una herramienta diagnóstica útil para predecir la positividad del urocultivo. los conocimientos fueron insatisfactorios lo que demuestra la necesidad de formular e implementar programas de educación, información y comunicación en salud acorde con el perfil hallado. La escala presentó buena validez, fiabilidad y consistencia interna.

Introduction: first aids are an effective form to provide care in accidents at home, work, study and public places. In Medellin and Bello is unknown the profile of knowledge of subjects in high school and there are no valid and reliable scale to measure them. Objective: to construe and to evaluate a scale of knowledge in first aids and analyze the score in students of tenth and eleventh. Materials and methods: cross-sectional study in 445 students selected using probability sampling. In the evaluation of the scale was determined appearance, content and construct validity, reliability with Cronbach α and internal consistency with Pearson coefficient. The Knowledge profile was analyzed with frequencies and summary measures, U Mann-Whitney, Spearman correlation, ANOVA and multivariate linear regression. Results: the reliability was 0.7, significant correlations were found between each point of the scale and global knowledge score, which was 42(on a scale of 0-100) and had no statistical association with age, gender, grade or municipality of residence, only there was association with the social stratum. Conclusion: the knowledge was unsatisfactory demonstrating the need to develop and implement Education Information and Communication programs in health. The scale showed good validity, reliability and internal consistency.

Diseño de un panel multicolor para evaluar moléculas intracelulares y de superficie mediante citometría de flujo / Design of a multicolor panel to assess intracellular and surface molecules by flow cytometry

Introducción. La citometría de flujo permite detectar la presencia de moléculas intracelulares y de superficie, de forma simultánea sobre cada célula. Objetivo. Describir un método para la construcción armónica de un panel multicolor con 11 parámetros para el análisis fenotípico y funcional de linfocitos T (LT) CD8 + por citometría de flujo. Materiales y métodos. Para la construcción del panel multicolor, se seleccionaron las moléculas y se titularon los conjugados con fluorocromos para la determinación de CD3, CD8, CCR7, CD28, CD27, CD45RA, CD95 y CD127, en células mononucleares de sangre periférica. Para la evaluación del panel, se hizo la construcción progresiva adicionando uno a uno los conjugados y la fluorescencia menos uno (FMO). Este método fue aplicado para células ex vivo y para evaluar la producción de IFN ? , IL-2 y TNFa frente al estímulo con la enterotoxina B de Staphylococcus aureus (SEB) y al antígeno crudo de Trypanosoma cruzi . Finalmente, se procedió al análisis de las subpoblaciones de LT CD8 + ex vivo en individuos sanos. Resultados. La evaluación de las moléculas con los conjugados no mostró interferencia en las señales de fluorescencia. Las frecuencias de las subpoblaciones de LT CD8 + evaluadas fueron cercanas a los valores reportados en otros estudios. Además, se observó que la frecuencia de LT CD8 + productores de IFN ? , IL-2 y TNFa fue mayor a las seis horas de cultivo con SEB y con el antígeno crudo de T. cruzi . Conclusiones. El método aplicado para la construcción del panel multicolor permite obtener frecuencias de las subpoblaciones de LT CD8 + que corresponden a lo reportado en la literatura científica.

Introduction: Flow cytometry allows simultaneous detection of surface and intracellular molecules on each cell. Objective: To describe a method for building up a harmonic multicolor panel with 11 flow cytometry parameters for phenotypic and functional analysis on CD8 + T lymphocytes. Materials and methods: For the multicolor panel construction, we selected the molecules and titred conjugated antibodies with fluorochromes for CD3, CD8, CCR7, CD28, CD27, CD45RA, CD95 and CD127 determination in peripheral blood mononuclear cells (PBMC). To evaluate the panel, the conjugated antibodies were gradually added one by one and fluorescence minus one (FMO) test was performed. This method was applied to assess ex vivo subpopulations of T cells and the production of intracellular IFN ? , IL-2 and TNF a using polyclonal stimulation with enterotoxin B from Staphylococcus aureus (SEB) and antigen-specific cells with crude Trypanosoma cruzi antigen. Finally, the ex vivo CD8 + T lymphocyte subpopulations frequencies were analyzed in healthy individuals. Results: The evaluation of the selected molecules and conjugates did not show interference in the fluorescence signals and detection. The frequencies of CD8 + T cells evaluated were similar to the values reported in other studies. Additionally, we observed that the frequency of CD8 + T lymphocytes producing IFN ? , IL-2 and TNF a was higher 6 hours after culture with SEB and crude T. cruzi lysate. Conclusions: The method used for the construction of a multicolor panel allows obtaining frequencies of CD8 + T lymphocyte subpopulations corresponding to those reported in the literature.

A human astrocytoma cell line is highly susceptible to infection with Trypanosoma cruzi

Astrocytes play a vital role in neuronal protection, homeostasis, vascular interchange and the local immune response. Some viruses and parasites can cross the blood-brain barrier and infect glia. Trypanosoma cruzi, the aetiological agent of Chagas disease, can seriously compromise the central nervous system, mainly in immune-suppressed individuals, but also during the acute phase of the infection. In this report, the infective capacity of T. cruzi in a human astrocyte tumour-derived cell line was studied. Astrocytes exposed to trypomastigotes (1:10 ratio) produced intracellular amastigotes and new trypomastigotes emerged by day 4 post-infection (p.i.). At day 6 p.i., 93% of the cells were infected. Using flow cytometry, changes were observed in both the expression of major histocompatibility complex class I and II molecules and the chemokine secretion pattern of astrocytes exposed to the parasite. Blocking the low-density lipoprotein receptor on astrocytes did not reduce parasite intracellular infection. Thus, T. cruzi can infect astrocytes and modulate the immune response during central nervous system infection.

Expression of inhibitory receptors on CD4+ and CD8+ T cells from healthy Colombian donors / Expresión de receptores Inhibidores en linfocitos T CD4+ y CD8+ de donantes sanos Colombianos / Expressão de receptores inibitórios sobre linfócitos T CD4+ e CD8+ de doadores saudáveis Colombianos

T cell activation involves positive cellular signals that promote effector functions and negative signals that contribute to the regulation of these responses. These regulatory signals are generated upon activation of receptors on T cells that include CD160, 2B4, Programmed Death-1 and CTLA-4. Objective. To evaluate the expression of inhibitory receptors like CD160, 2B4, Programmed Death-1 and CTLA-4 on CD4+ and CD8+ T cells from healthy Colombian donors. Materials and methods. Peripheral blood mononuclear cells from 30 healthy donors from Bogotá (Colombia) were obtained via Ficoll-Hypaque density gradient and cells were stained with specific conjugated antibodies previously titrated. Results. The CD160, 2B4, and Programmed Death-1 inhibitory markers were detected on CD4+ T cells with expression levels of 0.35%, 1.04%, and 1.35%, respectively. On CD8+ T cells, these markers were expressed at higher levels: 16%, 8.97%, and 4.3%, respectively. In contrast to the other receptors, CTLA-4 frequency of expression showed no significant difference between CD4+ (1.56%) and CD8+ (1.53%) T cells. Frequency of CD160/2B4 and CTLA-4/ Programmed Death-1 coexpression was 0.18% and 0.09% on CD4+ cells, and 4.02% and 0.2% on CD8+ T cells. Conclusions. This is the first report showing the frequency of inhibitory receptors such as CD160, 2B4, Programmed Death-1, and CTLA-4 on CD4+ and CD8+ T cells from healthy Colombian donors. Our findings serve as a baseline for the analysis and comparison of these receptors in Colombian populations with different disease conditions.

La activación de células T involucra señales positivas que promueven funciones efectoras y señales negativas que contribuyen a la regulación de la respuesta inmune. Estas actividades regulatorias son generadas por la activación de receptores de las células T e incluyen moléculas como CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4. Objetivo. Evaluar la expresión de los receptores inhibitorios CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4 en células T CD4+ y CD8+ de donantes sanos colombianos. Materiales y métodos. Se obtuvieron células mononucleares de sangre periférica de 30 donantes sanos provenientes de Bogotá (Colombia) mediante gradiente de densidad por Ficoll-Hypaque, las células fueron marcadas con anticuerpos conjugados a fluorocromos previamente titulados. Resultados. CD160, 2B4, y PD-1 presentaron porcentajes de expresión en células T CD4+ de 0.35%, 1.04% y 1.35% respectivamente. En células T CD8+ estos receptores mostraron niveles de expresión más altos con porcentajes de 16.3%, 8.97% y 4.3% respectivamente. A diferencia de los otros receptores, CTLA-4 no mostró diferencias entre células T CD4+ (1.56%) y CD8+ (1.53%). Los porcentajes de co-expresión de CD160/2B4 y CTLA-4/PD-1 en células T CD4+ fueron de 0.18% y 0.09%, en células T CD8+ se observaron porcentajes de expresión de 4.02% y 0.2%. Conclusión. Este es el primer reporte que muestra la frecuencia de expresión de receptores inhibitorios tales como CD160, 2B4, PD-1 y CTLA-4 en células T CD4+ y CD8+ de donantes sanos colombianos. Estos hallazgos representan una línea de base para el análisis y la comparación de estos receptores en la población colombiana con diferentes enfermedades.

A ativação de células T envolve sinais positivos que promovem funções efetoras e sinais negativos que contribuem para a regulação da resposta imune. Estas atividades reguladoras são geradas através da ativação de receptores de células T e incluem moléculas tais como CD160, 2B4, PD-1 e CTLA-4. Objetivo. Avaliar a expressão de receptores inibitórios CD160 e 2B4, PD-1 e CTLA-4 em células T CD4+ e CD8+ de doadores saudáveis colombianos. Materiais e métodos. Foram obtidas células mononucleares do sangue periférico de 30 doadores saudáveis provenientes de Bogotá (Colômbia) a partir de gradiente de densidade por Ficoll-Hypaque, as células foram marcadas com anticorpos conjugados com fluorocromos previamente titulados. Resultados. CD160, 2B4, e PD-1 mostraram percentagens de expressão em células T CD4+ de 0,35%, 1,04% e 1,35%, respectivamente. Em células T CD8+ estes receptores mostraram níveis de expressão mais elevados com percentagens de 16,3%, 8,97% e 4,3% respectivamente. Ao contrário de outros receptores, CTLA-4 não apresentou diferenças entre células T CD4+ (1,56%) e CD8+ (1,53%). As percentagens de co-expressão de CD160/2B4 e CTLA-4/PD-1 em células T CD4+ foram de 0,18% e 0,09%; em células T CD8+ foram observadas percentagens de expressão de 4,02% e 0,2%. Conclusão. Este é o primeiro relatório que apresenta a frequência de expressão de receptores inibitórios tais como CD160, 2B4, PD-1 e CTLA-4 em células T CD4+ e CD8+ de doadores saudáveis colombianos. Estes resultados representam uma linha de base para análise e comparação desses receptores na população colombiana com diferentes doenças.

De lo innato y lo adaptativo: premio Nobel de Medicina y Fisiología 2011: [Editorial] / From innate to the adaptive: Nobel Prize for Medicine or Physiology 2011: [Editorial]

La Real Academia de la Lengua Española define la palabra "innato" como algo connatural o propio a la naturaleza del ser viviente. A pesar de que los dos tipos de la respuesta inmunitaria se empezaron a configurar desde el principio el siglo XX, la inmunidad innata por muchos años parecía estar allí solamente acompañando la descripción y los avances de la inmunidad específica o adaptativa. El primer premio Nobel de Medicina de 1901 fue otorgado a Emil Adolf von Behring por sus estudios del suero inmune como tratamiento contra la difteria, trabajo que puso en contexto la funcionalidad de los anticuerpos. La inmunidad innata se impulsó gracias a los trabajos del zoólogo ruso Ilya Mechnikov, quien compartió con Paul Ehrlich el premio Nobel de Medicina de 1908; al primero le fue otorgado por sus estudios sobre la fagocitosis.

The Real Academia de la Lengua Española defines the word "innate" as something connatural or proper to the nature of the living being. Although the two types of immune response began to take shape at the beginning of the 20th century, innate immunity for many years seemed to be there only to accompany the description and advances of specific or adaptive immunity. The first Nobel Prize in Medicine in 1901 was awarded to Emil Adolf von Behring for his studies of immune serum as a treatment for diphtheria, work that put the functionality of antibodies into context. Innate immunity was boosted by the work of Russian zoologist Ilya Mechnikov, who shared the 1908 Nobel Prize in Medicine with Paul Ehrlich; the former was awarded for his studies on phagocytosis.

Expresión de IL-10, IL-4 e IFN- γ en lesiones activas de piel en niños con urticaria papular por picadura de pulga / Expression of IL-10, IL-4 and IFN-γ in active skin lesions of children with papular urticaria

Introducción. La urticaria papular por picadura de pulga se conoce como una enfermedad alérgica. Sin embargo, las investigaciones no muestran una clara relación con las enfermedades alérgicas. Objetivo. Estudiar la expresión de IL-10, IL-4 e IFN-γ, como marcadores de la respuesta efectora de células T en lesiones de piel de pacientes con urticaria papular por picadura de pulga. Materiales y métodos. Se incluyeron 14 biopsias de lesiones de piel de niños con diagnóstico de urticaria papular por picadura de pulga y 5 biopsias de piel sana obtenidas de niños sometidos a cirugía por enfermedades no inflamatorias. Todas las muestras se obtuvieron de niños menores de 12 años. Se extrajo ARN con trizol y se cuantificaron los niveles de expresión de las citocinas con la técnica de reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. Resultados. En los pacientes con urticaria papular por picadura de pulga, se encontró amplia diversidad en los niveles de expresión de IFN-γ e IL-10, y valores bajos constantes para IL-4. Se observaron tres perfiles que no corresponden a un patrón común en los pacientes. Las muestras obtenidas de tejidos sanos no presentaron expresión de las citocinas. Conclusiones. Los datos corresponden a la primera descripción de citocinas que median la respuesta inmunitaria en el sitio de la lesión cutánea en niños con con urticaria papular por picadura de pulga, lo cual indica que la respuesta local es mixta ya que no se encuentra predominio de un fenotipo específico en ninguno de los pacientes.

Introduction: Papular urticaria caused by the bites of fleas traditionally has been defined as a chronic allergic disease. However, currently no clear relationship has been described between this pathology and common allergic diseases. Objective: The expression of IL-10, IL-4 and IFN-γ as markers of effector T cell responses was examined in skin lesions of patients with papular urticaria by flea bite. Materials and methods: Fourteen skin lesion biopsies were sampled from children with a clinical diagnosis of papular urticaria by flea bite and were compared with 5 healthy skin biopsies of children with no history of the disease. All children were under 12 years old. RNA was extracted with trizol and the expression levels of cytokines were analyzed by real time PCR technique. Results: A wide range in the expression levels of IFN-γ and IL-10 was noted as well as constant low values of IL-4. Three distinct profiles were observed, but which did not correspond to a recognizable pattern among the patients. The samples obtained from healthy tissues showed no expression of any of the cytokines. Conclusions: This is the first characterization of cytokines that mediate the immune response at the site of the skin lesion in children with papular urticaria by flea bite. The data indicated that the local response was mixed and that a single phenotype is not predominant among the patients.

Valores de referencia de células asesinas naturales (NK y NKT) en donantes de sangre de Bogotá / Reference values of the natural killer cells (NK and NKT) on blood donors in Bogota

Introducción: las células asesinas naturales (NK y NKT) son una población de linfocitos que circulan en bajos porcentajes en sangre periférica. Ambos tipos de células realizan un papel importante en la respuesta inmune en condiciones normales o en procesos patológicos como ciertos tumores,abortos espontáneos y en el rechazo a trasplantes, lo cual les confiere un gran interés clínico. Objetivo: el presente trabajo pretende establecer valores para las células NK y NKT por medio decitometría de flujo en una población adulta de donantes de un banco de sangre de Bogotá. Metodología: se recolectaron 104 muestras de donantes y se realizó un estudio con los marcadores CD3, CD16 y CD56.Resultados: de las muestras 47.2% fueron mujeres y 52.8% hombres. Para las mujeres el porcentajede células fue: NK 14.6% (μ 12.1) y NKT 3.0% (μ 2.5); para hombres NK 25.3% (μ 21.3) y NKT 3.5% (μ 2.9). Los valores absolutos de células para mujeres fueron NK 298.8 /µL (μ 253.9) y NKT 70.1 /µL (μ 47.7); para hombres NK 526.1 /µL (μ 448) y NKT 95.5 /µL (μ 77). Existe una diferencia estadística entre los valores absolutos par las células NK entre hombres y mujeres (p= 0.0004).

Introduction: the natural killer cells (NK y NKT) are a population of lymphocytes that circulate in the peripheral blood but in low percentages. Both types of cells play an important role in immuneresponse under normal conditions or in pathological processes as it is the case of certain tumors, spontaneous abortions and transplant rejections, what makes them very interesting from the clinical interest point of view.Objective: the aim of this work is to establish values for NK and NKT cells by means of flow cytometry in a group of adult population of blood donors in a blood bank in Bogotá. Methodology: 104 donor samples were collected and a study was carried out with CD3, CD56and CD16 markers. Results: 47.2% of the samples were women and 52.8% men. In the case of women the cellspercentage was: NK 14.6% (μ 12.1) and NKT 3.0% (μ 2.5); for men NK 25.3% (μ 21.3) and NKT 3.5% (μ 2.9). The absolute cells values for women were NK 298.8 /µL (μ 253.9) and NKT 70.1 /µL (μ 47.7); for men NK 526.1 /µL (μ 448) and NKT 95.5 /µL (μ 77). There is a statistical differencebetween the absolute values by the NK cells between men and women. (p= 0.0004).

Producción de anticuerpos IgG1 anti-glucuronoxilomanana en ratones resistentes a la criptococosis / Anti-glucuronoxylomannan IgG1 specific antibodies production in Cryptococcus neoformans resistant mice

Cryptococcus neoformans is a widely disseminated fungus shown to be responsible for infections in individuals with impaired cell mediated immunity, such as patients with human immunodeficiency virus (HIV). Cryptococcus neoformans has a polysaccharide capsule composed of glucuronoxylomannan (GXM), which acts as a major virulence factor and is considered to be a thymus independent type-2 antigen (TI-2). Objective. In the current study, the production kinetics were evaluated for IgG subclasses specific for GXM, and assessed with the cross reactive antibodies to Streptococcus pneumoniae polysaccharide. In addition, spleen B cell subpopulations were quantified in murine models of cryptococcosis with different susceptibilities to the infection. Materials and methods. Antibodies were detected by ELISA at different time intervals after C. neoformans infection in moderately resistant (Balb/c), highly resistant (CBA/j) and susceptible (C57BL/6) mouse strains. B cells subpopulations were determined by flow cytometry analysis. Results. Early production of IgG1, described as protector antibodies, coincided with a decrease of the number of C. neoformans colony forming units in the lungs. Polysaccharide cross-reactive antibodies were detected in each of the three mouse strains. Antibody titers were highest in the susceptible strain (C57BL/6), a strain which also showed the highest proportion of splenic CD5+ B lymphocytes. In contrast, CBA/J mice showed the highest levels of CD43+ B. Conclusions. These findings suggest that IgG1 antibodies specific for GXM, are implicated in host protection against C. neoformans infection and may be regulated by CD43+ cells. They also suggest that cross reactivity antibodies are not important in the protection against C. neoformans infection

Efecto de la capsaicina sobre la proliferación y ciclo celular de fibroblastos pulpares humanos / The effect of capsaicin on proliferation and cell cycle of human pulp fibroblasts

La capsaicina es un vanilloide natural que controla la inflamación neurogénica disminuyendo los neuropeptidos en la sinapsis neuronal. Nosotros determinamos el efecto de la capsaicina sobre la proliferación y el ciclo celular de fibroblastos pulpares humanos en cultivo (FPH). La dosis con la que se obtuvo el más alto porcentaje de células en proceso de división celular fue la capsaicina 10-16 M a las 24 y 96 horas. Sin embargo, con esta dosis también se observó una ruptura de la monocapa y una disminución significativa en el conteo de células, especialmente a las 24 horas. Estos mismos cambios, aunque en menor proporción, también fueron observados con capsaicina 10-8M. Con relación al tiempo, hubo un aumento significativo en el número de cèlulas en fase 24 y 72 horas. Estos efectos sobre el receptor para vanillides (VR1) dependientes del tiempo han sido descritos anteriormente en neuronas tratadas con capsaicina y se ha denominado taquifilaxis

Determinacion de valores de linfocitos TCD3+, CD3+/CD4+ y CD3+/CD8+ por citometria de flujo en adultos donantes de sangre del Hospital Universitario San Ignacio de Bogota / Determination of values of T-lymphocytes TCD3+, CD3+/CD4+ and CD3+/CD8+ for flow cytometry in donors blood adults of in Hospital Universitario San Ignacio, Bogota

Objetivo: determinar los valores de linfocitos T CD3+, CD3+/CD4+ y CD3+/CD8+ por citometría de flujo en una población adulta de donantes del Banco de Sangre del Hospital Universitario San Ignacio de Bogotá. Material y métodos: se seleccionaron 60 muestras de sangre periférica a las cuales se les analizó la población de leucocitos mediante los métodos de recuento manual total y diferencial, así como el recuento diferencial de linfocitos utilizando características morfológicas o la expresión de CD14 y CD45 por citometría de flujo. Las subpoblaciones de linfocitos fueron determinadas utilizando mareaje con tres fluorocromos para CD3, CD4 y CD8. Resultados: los porcentajes de linfocitos totales seleccionados mediante la expresión de CD45 o mediante el tamaño y la granularidad fueron similares. Los valores de linfocitos T CD3+ expresados en porcentaje presentaron un promedio de 64.9, con percentiles 5 y 95 de 50.1 - 79.4 y en valores absolutos (células/mi), el promedio fue 1358.8 células/mi, con percentiles de 743.7 - 2,259.8. Para los linfocitos TCD3+/ CD4+ en porcentaje el promedio fue de 33.8 con percentiles de 23.0 - 44.5, un promedio de 702 células con percentiles de 349.3 -1,256.3. Finalmente para los linfocitos T CD3+/CD8+ expresados en porcentaje el promedio fue 28.3 con percentiles 16.3 - 41.7 y un promedio de 555.6 células/ul con percentiles 225.7 y 1,011.2. Conclusiones: utilizando la metodología descrita en la que se combina sistemas automatizados y manuales, se demostró que los valores de linfocitos T son similares a los reportados a nivel nacional como internacional.